整体课题外包效劳
一、整体课题（严谨真实、效果可靠）
1. 高通量基因筛�。。河酶咄坎庑颉⒒蛐酒� CRISPR/Cas9 文库举行要害基因筛选。。
真核转录组测序、外显子组测序、基因表达谱芯片、miRNA 测序/芯片
m6A 甲基化测序、lncRNA 测序/芯片、单细胞转录组测序、iTRAQ 卵白质组定量
Nat Commun. 2016 Apr 6;7:11215.
2. 基因调控：用病毒或质粒载体介导基因过表达、敲除或滋扰， ，，， ，可以实现对基因表达的上调或下调。。
过表达质粒、滋扰质粒、CRISPR/Cas9 质粒
腺相关病毒（AAV）、慢病毒（LV）、腺病毒（ADV）、逆转录病毒（RV）
3. 细胞水平验证：在细胞水平验证基因的功效， ，，， ，包括细胞增殖、细胞迁徙与侵袭、细胞凋亡、细胞周期等。。
J Hepatol. 2018 Jun;68(6):1214-1227.
4. 动物体内实验：通过构建动物模子检测基因水平转变后引起的指标转变， ，，， ，包括皮下成瘤、原位成瘤、巨细等。。
J Hepatol. 2018 Jun;68(6):1214-1227.
5. 作用机制研究：进一步挖掘出与要害基因相关的信号通路或其它基因， ，，， ，包括双萤光素酶检测、RNA pull-down、BioID、CO-IP 等。。
J Hepatol. 2018 Jun;68(6):1214-1227.
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二、神经整体课题（团队专业、效劳完善）
1. 疾病模子构建：专业提供慢性痛、脑卒中、抑郁、神经退行性疾病、癫痫等神经系统动物疾病模子的构建。。
Cichon J et al.,Bio Protoc.2018；；；；Proc Natl Acad Sci U S A. 2017 Jul 11;114(28):E5673-E5682.
2. 环路示踪：借助病毒载体的示踪手艺， ，，， ，可实现对全脑、核团、环路、细胞、单细胞及亚细胞器的标记， ，，， ，从重大的神经环路到高区分率的单神经元形态， ，，， ，建设完善的示踪系统。。
Cell Stem Cell. 2020 Mar 5;26(3):331-345.e6.
3. 元件操控：通过病毒载体和脑定位注射手艺可完成基因过表达、基因默然、光遗传学、化学遗传学的精准特异性操控。。
Science. 2018 Oct 26;362(6413):429-434.
4. 表型筛选及转变：从分子到细胞再到行为的一站式效劳， ，，， ，包括 WB、qPCR、电心理、病理、免疫组化、行为学实验。。
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三、m6A 甲基化课题（思绪设计、效劳完善）
1. 预实验：找到与 RNA 甲基化相关的酶是否有差别表达或检测整体 m6A 水平， ，，， ，用 qPCR、WB、组织芯片、质谱检测等， ，，， ，再举行甲基化酶敲低、敲除和过表达细胞实验和动物实验。。
Song H et al. Autophagy. 2019；；；；Chen M. et al. (2018) Hepatology, 67(6): 2254
2. 通过 m6A-seq 测序， ，，， ，可以知道哪些基因在 RNA 甲基化修饰上有差别,再连系转录组测序， ，，， ，发明差别基因的表达水平转变。。
Chen M. et al. (2018) Hepatology, 67(6): 2254
3. 获得 RNA 甲基化修饰的目的基因后， ，，， ，再对 m6A 甲基化举行修复， ，，， ，视察位点修复正常后对细胞表型和小鼠成瘤及巨细的影响。。
Huang H et al. Nat Cell Biol. 2018
4. 进一步挖掘甲基化酶通过哪些通路对目的基因举行调控或卵白互作手艺挖掘卵白， ，，， ，包括卵白与 DNA 或 RNA 互作、卵白与卵白互作、靶基因验证等。。
Chen M. et al. (2018) Hepatology, 67(6): 2254
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四、外泌体研究课题（履历富厚、质量可靠）
1. 外泌体疏散：差速超速离心法可以获得高质量、高纯度的外泌体， ，，， ，因此被以为是疏散要领中的「金标准」， ，，， ，也是高分文章中常选的疏散要领。。
2. 外泌体判断：常用的判断要领包括透射电镜（TEM）、纳米粒径跟踪剖析（NTA）、Western Blot（WB）标记物检测等。。
ACS Nano. 2019 Feb 26;13(2):2450-2462.
3. 高通量剖析：外泌体内含有与细胞泉源相关的核酸和卵白质， ，，， ，可以转达 mRNA、miRNA、lncRNA、circRNA、卵白质等进入受体细胞， ，，， ，加入细胞间通讯。。
Cell Commun Signal. 2019 Aug 16;17(1):96.
4. 外泌体示踪：常用亲脂性染料对外泌体举行标记， ，，， ，主要包括两类， ，，， ，一是 PKH67（绿色）和 PKH26（红色）， ，，， ，二是 DiO（绿色）、DiI（橙色）和 DiR（深红）。。
Oncol Rep. 2012 Nov;28(5):1551-8；；；；2019 Oct 29;19(1):1015.
5. 体内外功效研究：将标记的外泌体与受体细胞共作育， ，，， ，视察细胞功效转变， ，，， ，再将外泌体注射入动物模子中， ，，， ，视察成瘤巨细， ，，， ，并检测相关指标。。
Nat Commun. 2018 Jan 15;9(1):191.
